domingo, 28 de febrero de 2021

 Técnicas de Edición de Ácidos Nucleicos en Ascariasis

Tipo de Edición: Ex Vivo - Germinal

Dirigido hacia: ARN dirigido a ADN gen unc-22, gen daf-16

Dirigido por: CRISPR/Cas 9

Órgano/células a tratar: Epitelio intestinal

Vía de administración: Microinyección gonadal

Resultados: 

Corto plazo: Introducción de mutaciones en los nemátodos para producir ineficacia en su patogénesis.

Mediano plazo: Permite la mejor comprensión de los genes y las vías de señalización que dan forma a las interacciones especificas del nemátodo parásito con su huésped.

Largo plazo: Para producir vacunas contra los helmintos.

Referencias:

Castelletto M, Gang S, Hallem E. Recent advances in functional genomics for parasitic nematodes of mammals. The Journal of Experimental Biology [Internet]. 2020 [citado el  28 de febrero de 2021];223(Suppl 1):jeb206482. Disponible en: https://jeb.biologists.org/content/223/Suppl_1/jeb206482?utm_source=TrendMD&utm_medium=cpc&utm_campaign=J_Exp_Biol_TrendMD_1#sec-6

domingo, 21 de febrero de 2021

 Stem Cells en Ascariasis

Tema: Organoides-nuevos modelos para interacciones entre huésped-helminto

Tipo de Stem Cell: iPSC

Método de obtención: Obtenida por reprogramación celular.

Células usada para la reprogramación celular fueron los fibroblastos además se implicaron el uso de  cócteles (Klf 4, Oct4, Sox 2, c-Myc) con el fin de convertirse en células epiteliales intestinales.

Vía de administración: Vía parenteral

Resultados

Corto plazo: 

Comprender las interacciones moleculares y celulares de los helmintos con su huésped.

Mediano plazo:

La composición multicelular de los organoides permite estudiar el papel de los diferentes tipos de células en la invasión y colonización del helminto, el daño del huésped y las respuestas.

Los organoides pueden generar a partir de células madre derivadas del paciente, permitiendo estudiar el impacto a largo plazo de las infecciones patógenas en las características histológicas y fenotipos fisiológicos.

Largo plazo:

Como nuevas vías importantes para el desarrollo de nuevas terapias y vacunas contra helmintos, para entender los efectos antiinflamatorios de las infecciones por helminto, y para el uso de helmintos o sus productos como terapias alternativas para tratar enfermedades inflamatorias.




Referencias:
Duque-Correa M, Maizels R, Grencis R, Berriman M. Organoids – New Models for Host–Helminth Interactions. Trends in Parasitology [Internet]. 2020 [citado el 21 de febrero de 2021];36(2):170-181. Disponible en: https://uceedu-my.sharepoint.com/:b:/g/personal/jmvillamarin_uce_edu_ec/EasjM1eT5VpCg8P12M00Re0BRyHa0SsaFfYRTslIgvZNRw?e=FzwMEY





domingo, 14 de febrero de 2021

Animal transgénico para Ascariasis

Tema: Células T reguladoras en la infección por helmintos: inducción, función y potencial terapéutico. (1)

Tipo de animal transgénico: Ratones Knock- In (1)

Método por el que se obtuvo: Microinyección pronuclear (1)

Uso que se les ha dado: Simular enfermedad humana para comprender el proceso fisiopatológico y posible tratamiento. (1)

Explicación a detalle del uso:

Un papel clave son las células T reguladoras, estas células permiten que el parásito no solo sobreviva durante más tiempo en el humano, sino que también proteja al huésped de una respuesta inmune potencialmente patógena, significa que el helminto dentro del huésped puede desempeñar un papel importante en la regulación de los trastornos inmunológicos en los seres humanos. (1)

Con esta evidencia se apoya un papel central para Tregs inducido por parásitos en la regulación inmune por helmintos, esto permite comprender los mecanismos por lo que se produce esta inducción lo que puede proporcionar conocimientos esenciales para las vacunas y tratamientos farmacológicos. (1)




Ventajas y desventajas de los transgénicos

Ventajas

1. Permite simular enfermedades humanas y comprender el proceso fisiopatológico. (2)

2. Permite el desarrollo de tratamiento como vacunas, fármacos para enfermedades. (2)

3. Permite transformar a los animales en fábricas para la producción de proteínas de interés terapéutico e industrial. Las ovejas y cerdos ya modificados genéticamente están produciendo productos como la insulina y los factores de coagulación. (2)

4. Los animales están siendo considerados como donantes potenciales de órganos para pacientes con trasplante de órganos humanos. (2)

5. Mejorar la calidad de producción. La producción de animales y plantas resistentes a enfermedades y plagas económicamente devastadoras da el paso de ahorro de millones de dólares por parte de la industria ganadera y agrícola.(2)

Desventajas

1.El sufrimiento animal por parte de estos ensayos clínicos. (2)

2.Atenta en contra de la identidad genética de una especie, y esto supone grandes problemas éticos y morales. (2)

3. Otra área de preocupación es el límite construido entre lo que se considera "natural" y "antinatural". Para muchas personas, el cruce de especies es "antinatural", esto se vuelve especialmente problemático. (2)

4. Daños irreversibles e imprevisibles a plantas y animales tratados.(3)

5. El uso de alimentos transgénicos ha dado lugar a problemas de salud que han incluido la alergenicidad, los trastornos gastrointestinales y la carcinogenicidad. (3)



Referencias:

1. White M, McManus C, Maizels R. Regulatory T‐cells in helminth infection: induction, function and therapeutic potential. Immunology [Internet]. 2020 [citado 14 de febrero de 2021];160(3):248-260. Disponible en: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/imm.13190

2. Uzoeto O, Eruka N, Malachi J, Ezema T, Onele D, Okechukwu M et al. THE USE OF TRANSGENIC ANIMALS IN CLINICAL RESEARCH; THE PROS AND CONS (REVIEW). Pharmacologyonline [Internet]. 2019 [citado el 14 de febrero de 2021];2. Disponible en: https://uceedu-my.sharepoint.com/:b:/g/personal/jmvillamarin_uce_edu_ec/Efgnv7p8BilCglHgOExYSvQBe6Ih1Z2fejGrYJb_wkf-6g?e=7TJbtP

3. Pjesivac I, Hayslett MA, Binford MT.To Eat or Not to Eat: Framing of GMOs in American Media and Its Effects on Attitudes and Behaviors. Science Communication. [Internet]. 2020 [citado el 14 de febrero de 2021];42(6):747-775. Disponible en: https://sci-hub.se/https://doi.org/10.1177/1075547020947743



domingo, 7 de febrero de 2021

ADN recombinante artificial en la Ascariasis 

T: As16 recombinante expresado por levadura protege a los ratones contra la infección por Ascaris suum a través de la inducción de una respuesta inmune sesgada por Th2

O: Elaborar una vacuna antihelmíntica dirigida a las infecciones de Ascaris a través las proteínas As16 y As14 recombinantes.

G: Secuencia de As16(15,4 kDa) y As14(14,8 kDa)

ER: XhoI y AyrII

EL: Ligasa T4

V: pPICZ-A

CR: E.coli DH5a.

MTG: Transformación

MIC: Cultivo, Western blot, ELISA

Recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza

El ADN donador que no porta información necesaria para su propia replicación debe combinarse con el ADN del receptor a fin de establecerse en la cepa receptora. Por lo cual se describe a la conjugación bacteriana. La conjugación produce una transferencia unidireccional de ADN desde una célula donante hasta una célula receptora a través de llamado pilus sexual. El plásmido libre se desplaza de la célula donante a la receptora a través de un pilus sexual. El plásmido integrado favorece la transferencia de ADN genómico el cual se integra en el ADN de la célula receptora. (2)



Imagen obtenida por: Jawetz, Melnick y Adelberg. Microbiología médica. 25.ª ed. China: Mc Graw Hill; 2010. 


Referencias:


1. Wei J, Versteeg L, Liu Z, Keegan B, Gazzinelli-Guimaraes A, Fujiwara R et al. Yeast-expressed recombinant As16 protects mice against Ascaris suum infection through induction of a Th2-skewed immune response. PLOS Neglected Tropical Diseases [Internet]. 2017 [citado el 07 de febrero de 2021]; 11(7):e0005769. Disponible en: https://journals.plos.org/plosntds/article?id=10.1371/journal.pntd.0005769

2. Virolle C, Goldlust K, Djermoun S, Bigot S, Lesterlin C. Plasmid Transfer by Conjugation in Gram-Negative Bacteria: From the Cellular to the Community Level. Genes [Internet]. 2020 [citado el 07 de febrero de 2021];11(11):1239. Disponible en: https://www.mdpi.com/2073-4425/11/11/1239/htm